產(chǎn)品簡介：

臺盼藍（Trypan Blue，CAS NO. 72-57-1）是一種藍色酸性染料，含有兩個偶氮發(fā)色團。是一種較大、親水和四磺酸化的陰離子染料，普遍用于檢測細胞膜的完整性以及評估細胞的存活率。作為一種鑒定細胞存活的簡易方法，臺盼藍滲透進入喪失活性或細胞膜不完整的細胞將其染成藍色（通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經(jīng)死亡），而具有完整細胞膜的活細胞將染料排斥在外。因此，臺盼藍染色后，通過顯微鏡下觀察顏色的差異即可肉眼區(qū)分死細胞和活細胞，通過計數(shù)就可對細胞存活率進行比較精確的計算。

臺盼藍染色細胞存活率檢測試劑盒（Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit）是一款簡易的細胞存活率檢測試劑盒，含實驗所需的臺盼藍染色液和細胞重懸液，操作單快捷。

試劑盒組分 

組分 A: Cell Suspension Buffer 細胞重懸液       100ml

組分 B: 2×Trypan Blue Stain 2×臺盼藍染色液   10ml

使用方法

1.自備材料

1.1胰蛋白酶消化液

1.2血球計數(shù)板

1.3光學(xué)顯微鏡

2.細胞收集

對于懸浮細胞：1000~2000×g離心收集細胞，充分清洗后，棄上清，加入適量或1ml細胞重懸液將細胞沉淀重懸，制備成單細胞懸浮液。若有需要，可做適當(dāng)稀釋。

對于貼壁細胞：先用胰酶消化細胞，之后1000~2000×g離心收集細胞，充分清洗后，棄上清，加入適量或1ml細胞重懸液將細胞沉淀重懸，制備成單細胞懸浮液。若有需要，可做適當(dāng)稀釋。

3.臺盼藍染色

吸取100μl單細胞懸液到1.5ml離心管，加入100μl 2×臺盼藍染色液，輕輕混勻，室溫染色3min。

【注意】：一般情況染色3min足矣。某些情況可延長染色時間，但不宜超過10min。

4.細胞計數(shù)

吸取少量染色細胞到血球計數(shù)板內(nèi)，于普通光鏡10×物鏡下計數(shù)四個大格內(nèi)的細胞數(shù)，壓線者數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右，分別記錄著色細胞（包括損傷細胞和死細胞）和未著色細胞（活細胞）。

【注意】：用移液槍加樣，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個小室。不宜過量或量太少。

【注意】：每個細胞樣品至少需數(shù)500個細胞，數(shù)出藍色細胞和細胞總數(shù)。

細胞存活率計算公式如下：

細胞存活率（活細胞率）：Viability（%）=（總細胞數(shù)目-總著色細胞數(shù)）/總細胞數(shù)× 100

【注意】：處于健康的對數(shù)生長期細胞，通常情況活細胞至少占到95%。

保存與運輸方法

保存：2-8℃保存，1年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

臺盼藍具有輕微的細胞毒性，操作過程中請注意防護，避免與身體的直接接觸

凋亡小體偶爾也有臺盼藍拒染現(xiàn)象。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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